近期Biotechnology for Biofuels在线发表了华东理工大学最新的研究成果，该成果首次实现了苎烯在解脂耶氏酵母中生产，通过各种条件优化使得最终得到工程的产量为23.56mg/ml，该产量是目前酵母中的最高产量。
苎烯及目前的研究现状
苎烯（limonene）是一种单环单萜类化合物，是一种重要的药用化合物，在制药工业、食品行业以及饮料工艺上具有很广泛的运用。苎烯具有三种异构体：d型、dl型以及l型，其中d型的苎烯被美国食品和药物管理局认定为安全材料。
当前d型的苎烯主要来自一些饮料生产过程中的副产物，但是随着需求量的扩增以及在相关饮料生产过程中有毒物质的产生，于是迫切需要一种环保且高效的生产方法。
利用微生物作为底盘细胞来生产一些化学产品是一种环保且受研究者追捧的方法。利用大肠杆菌和酿酒酵母来生产苎烯已经已有报道。
解酯耶氏酵母
解脂耶氏酵母是一种安全的非致病微生物，它的操作工具完善、全基因组测序完成使得它作为一种很好的底盘细胞生长许多化学产品。
构建产苎烯代谢途径使解酯耶氏酵母产苎烯
Figure1.构建的苎烯代谢途径
研究者通过之前关于苎烯代谢途径的报道，在解脂耶氏酵母中构建了如上figure所展示的苎烯代谢途径，异源表达d-苎烯合成酶（d-limonene synthase，LS）和NDPS1（催化DMAPP和IPP形成NPP）两种基因，构建了完整的在解酯耶氏酵母中生产苎烯的代谢途径。
途径基因及发酵条件的优化使苎烯产量更上一层楼
尽管构建了苎烯的生产代谢途径，但是苎烯的产量不理想。于是研究者通过借助以前的研究，查阅大量相关的文献，高表达了3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶，经过研究发现高表达解脂耶氏酵母內源的HMG-CoA还原酶基因比高表达外源的HMG-CoA还原酶基因效果好。研究者还对途径基因(IDI、NDPS1)的拷贝做了研究。
除了途径基因相关的研究，研究者还对发酵条件做了研究，研究发现当发酵培养基中初始具有4g/l的丙酮酸和8%的十二烷的培养基对苎烯产量提高有帮助。
备注：
NPP:一种解脂耶氏酵母中生产单萜的底物，是香叶基二磷酸（GPP）的异构体
IDI:异戊二烯焦磷酸
