融合抗菌肽基因在重组毕赤酵母的表达及体外活性研究

唐健雪 肖水乐 彭俊杰 赵世纪 万小平 高荣**
 

(四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室四川省动物疫病预防与食品安全重点实验室成都610065)
 

摘要

目的:在毕赤酵母SMDI 168中表达融合抗菌肽，并检测其体外抑菌活性。

方法:本实验从实验室先前构建的重组质粒PVAXI一RHI4JT中克隆出已构建好的融合抗菌肽RHI4JT基因片段，

将RHI4JT基因片段插入至PGAPzaA真核表达质粒中，通过PCR和测序验证，构建PGAPZ。RHI4JT重组真核表达质粒，将线性化的PGAPZ。一RHI4JT电转化至毕赤酵母SMDI 168中获得重组酵母SMDPG一RHI4JT，并通过 PCR和RT一PCR验证，对重组毕赤酵母SMDPG一RHI4JT进行发酵，并收集发酵上清液进行体外生物活性测定。

结果:成功获得重组酵母SMDpG一RHI4JT菌株，重组酵母发酵上清液对大肠杆菌标准菌、大肠杆菌耐药菌、沙门氏菌标准菌、金黄色萄萄球菌标准菌、金黄色萄萄球菌耐药菌、肺炎链球菌标准菌均具有显著的抑菌活性。
结论:重组酵母表达的融合抗菌肽具有较广的抗菌谱和较高的抑菌活性，具有良好的潜在应用前景。
 

关键词 融合抗菌肽 基因表达 毕赤酵母 抑菌生物活性