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农用微生物菌剂国家标准(GB 20287-2006)

   日期:2015-02-09     来源:网络    浏览:57030    评论:0    
核心提示:本标准规定了农用微生物菌剂(即微生物接种剂)的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。 本标准适用于农用微生物菌剂类产品。
  
 前    言

本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款,其余为推荐性条款。

本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录,附录B为资料性附录。

农用微生物菌剂

1 范围

本标准规定了农用微生物菌剂(即微生物接种剂)的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。

本标准适用于农用微生物菌剂类产品。

2 规范性引用文件(略)

3 术语和定义(略)

4 产品分类

产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型;按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。

5 要求

5.1 菌种

    生产用的微生物菌种应安全、有效。生产者应提供菌种的分类鉴定报告,包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。生产者应提供菌种安全性评价资料。采用生物工程菌,应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。

5.2 产品外观(略)

5.3 产品技术指标

5.3.1 农用微生物菌剂产品的技术指标见表1,其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。

 

表1  农用微生物菌剂产品的技术指标

 

项   目

剂  型

液 体

粉 剂

颗 粒

有效活菌数(cfu)a  ,亿/g(mL)

≥

2.0

2.0

1.0

霉菌杂菌数,个/g(mL)

≤

3.0×106

3.0×106

3.0×106

杂菌率, %

≤

10.0

20.0

30.0

水分,%

≤

-

35.0

20.0

细度,%

≥

-

80

80

pH值

 

5.0~8.0

5.5~8.5

5.5~8.5

保质期b,月

≥

3

6

a 复合菌剂,每一种有效菌的数量不得少于0.01亿/g(mL);以单一的胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)制成的粉剂产品中有效活菌数不少于1.2亿/g。

b 此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。

 

 表2  有机物料腐熟剂产品的技术指标

 

项目

剂   型

液 体

粉 剂

颗 粒

有效活菌数(cfu), 亿/g(mL)

≥

1.0

0.50

0.50

纤维素酶活a,U/g(mL)

≥

30.0

30.0

30.0

蛋白酶活b,U/g(mL)

≥

15.0

15.0

15.0

水 分,%

≤

-

35.0

20.0

细 度,%

≥

-

70

70

pH值

 

5.0~8.5

5.5~8.5

5.5~8.5

保质期c,月

≥

3

6

a 以农作物秸秆类为腐熟对象测定纤维素酶活。

b 以畜禽粪便类为腐熟对象测定蛋白酶活。

c 此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。

 

5.3.2 农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。

            表3  农用微生物菌剂产品的无害化技术指标

 

参数

 

标准极限

粪大肠菌群数,个/g(mL)

≤

100

蛔虫卵死亡率,%

≥

95

砷及其化合物(以As计),mg/kg

≤

75

镉及其化合物(以Cd计),mg/kg

≤

10

铅及其化合物(以Pb计),mg/kg

≤

100

铬及其化合物(以Cr计),mg/kg

≤

150

汞及其化合物(以Hg计),mg/kg

≤

5

 

 

6 试验方法

6.1 仪器设备(略)

6.2 试剂(略)

6.3 产品参数的检测

6.3.1 外观(感官)的测定

取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中,仔细观察样品的颜色、形状、质地。

6.3.2 有效活菌数的测定

采用平板计数法,根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。

若采用最大可能数(Most Probable Number,MPN)5管法,遵照附录C的规定。

6.3.2.1 系列稀释

称取样品10 g(精确到0.01 g),加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中),静置20 min,在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min,即成母液菌悬液(基础液)。

用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中,按1:10进行系列稀释,分别得到1:1×101,1:1×102,1:1×103,1:1×104……稀释的菌悬液(每个稀释度应更换无菌移液管)。

6.3.2.2 加样及培养

每个样品取3个连续适宜的稀释度,用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL,加至预先制备好的固体培养基平板上,分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。

每一稀释度重复3次,同时以无菌水作空白对照,于适宜的条件下培养。

6.3.2.3 菌落识别

根据所检测菌种的技术资料,每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。当空白对照培养皿出现菌落数时,检测结果无效,应重做。

6.3.2.4 菌落计数

以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准(丝状真菌为10~150个菌落数),分别统计有效活菌数目和杂菌数目。当只有一个稀释度,其平均菌落数在20~300个之间时,则以该平均菌落数计算。若有两个稀释度,其平均菌落数均在20~300个之间时,应按两者菌落总数之比值决定。若其比值小于等于2应计算两者的平均数;若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。有效活菌数按式(1)或式(2)计算:

             nm = kv1/(m0v2) ×10-8                              …………………(1)

 

nv = kv1/(v0v2) ×10-8                                …………………(2)

 

式中:

nm — 质量有效活菌数,         亿/g

          nv — 体积有效活菌数,         亿/mL

          — 菌落平均数,             个

k — 稀释倍数

v1 — 基础液体积,             mL

v2 — 菌悬液加入量,           mL

v0 — 样品量,                 mL

m0 — 样品量,                 g

 

 
 
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