万古霉素发酵工艺的核心在于通过优化培养基配方、控制发酵条件及采用补料策略来显著提升产量，目前先进工艺的发酵效价可达14000U/mL以上。
理解了其重要性后，我们来看看几种具体的发酵方法。不同的生产工艺在产量和成本上差异显著。
1. 摇瓶发酵工艺
这是一种基础的研究级工艺，通过在实验室的摇瓶中优化培养基来寻找最佳配方。优化的配方通常包含：糊精6%作为碳源，黄豆饼粉2.8%和土豆蛋白0.6%作为氮源，并辅以氯化钠、氯化钙等无机盐。此方法能将产量从5000μg/mL提升至约6000μg/mL，为大规模生产提供重要数据支撑。
2. 三级发酵模式（常规工艺）
这是国内许多生产厂家曾长期使用的传统模式，但如今看来它存在不少弊端。其主要问题包括：因在种子培养基中添加葡萄糖而容易引发“葡萄糖效应”，抑制抗生素合成；最终发酵单位普遍较低，通常仅7000u/ml左右；而且发酵周期过长，超过160小时，导致能耗高、生产成本居高不下。
3. 特定补料发酵方法
为了克服传统模式的缺点，采用了补料发酵策略。其种子培养通常采用东方链霉菌，在30℃下培养24小时。发酵培养基则使用麦芽糊精6％、黄豆粉4％为核心，关键是从发酵第2天开始补加硫酸铵溶液，每日补加量占发酵液体积的0.1%。这一操作能持续为菌体生长提供必需氮源，从而将放罐时的万古霉素含量大幅提升至9877μg/ml。
4. 优化发酵工艺
这是目前更为先进的生产工艺，通过对发酵参数进行精确控制来实现高产。采用东方拟无枝酸菌V19-07为生产菌种，通过实验确定了最优条件：发酵温度28℃、发酵液pH值7.2、通气量1.0 vvm（每分钟每单位体积通气量）、以及将溶解氧浓度稳定在10%。此工艺在50升发酵罐中已验证成功，平均发酵效价高达14117U·mL - 1，产量较优化前提升了18.8，非常适合规模化生产。除了温度与pH，维持较高的溶氧水平对于好氧的放线菌合成次级代谢产物至关重要，这也是现代发酵控制的重点。
可以看到，从摇瓶实验到工业化生产，工艺的进步体现在每一个细节的优化上，而最终的优化工艺无疑是当前高效生产的关键。
